一、核心成分與配方特性
基礎配方
CellWorld PBS緩沖粉以磷酸鹽(Na?HPO?/KH?PO?)和氯化鈉(NaCl)為核心成分,通過共軛酸堿對實現pH緩沖(7.2-7.4),滲透壓與人體體液接近,適用于細胞培養和組織處理。
關鍵組分濃度:
磷酸鹽:10 mM(Na?HPO?)+1.8 mM(KH?PO?)
NaCl:137 mM(維持滲透壓)
KCl:2.7 mM(模擬細胞內液)
不含鈣鎂離子:避免與磷酸化抗體交叉反應,適用于磷酸化蛋白檢測。
變體配方對比
常規PBS:無鈣鎂,適用于免疫組化、細胞洗滌、試劑稀釋。
D-PBS(Dulbecco's PBS):添加0.9 mM Ca²?和0.5 mM Mg²?,更接近生理環境,用于胚胎干細胞培養、原代細胞培養。
含海藻糖PBS:添加5%海藻糖作為蛋白保護劑,適用于重組細胞因子稀釋和長期保存。
二、應用場景精準匹配
細胞培養與組織處理
推薦型號:D-PBS(含鈣鎂)或常規PBS(無鈣鎂)。
用途:
細胞運輸前沖洗培養液中的螯合劑。
稀釋細胞用于計數。
配制試劑溶液(如抗體稀釋液)。
優勢:滲透壓穩定,減少細胞滲透壓沖擊;無鈣鎂版本避免金屬離子沉淀。
免疫學實驗(Western Blot/ELISA)
推薦型號:常規PBS或PBST(PBS+0.05%-0.1%Tween-20)。
用途:
膜洗滌:PBST減少非特異性結合,降低背景信號。
抗體稀釋:PBS維持抗體穩定性。
優勢:pH 7.2-7.4接近生理環境,避免磷酸鹽對堿性磷酸酶(AP)標記系統的抑制。
高溫處理實驗
推薦型號:常規PBS。
優勢:高溫下pH穩定,不易漂移,適用于需要熱滅活的樣本處理。
三、選型決策樹
是否需要鈣鎂離子?
是(如原代細胞培養)→選D-PBS。
否(如免疫組化)→選常規PBS。
是否需要降低背景干擾?
是(如Western Blot)→選PBST(添加Tween-20)。
否→選常規PBS。
是否涉及蛋白長期保存?
是→選含5%海藻糖的PBS變體。
否→選基礎配方。
四、操作規范與注意事項
配制方法
步驟:
將PBS粉劑溶解于超純水(避免蒸餾水雜質)。
調節pH至7.2-7.4(25℃)。
定容至最終體積,過濾除菌(0.2μm濾膜)。
Tween-20添加:若需PBST,在配制完成后加入0.05%-0.1%Tween-20,緩慢攪拌避免泡沫。
儲存條件
粉劑:室溫干燥保存,有效期24個月。
溶液:
常規PBS/PBST:4℃保存3個月。
含Tween-20溶液:建議分裝后4℃保存,避免長期儲存導致渾濁。
避坑指南
pH調節:直接使用磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉粉末時,需嚴格按比例稱量,否則pH偏差影響實驗結果。
Tween-20起泡:添加時緩慢攪拌,避免產生大量泡沫導致體積不準確。
無菌要求:粉劑非無菌,用于細胞培養或活細胞實驗時需過濾除菌。
五、CellWorld產品優勢
質量穩定性:批次間pH和離子濃度一致,避免手動配制誤差。
規格靈活:提供2L/包、50L/包等規格,滿足實驗室不同需求。
定制服務:支持調整磷酸鹽、NaCl濃度或添加特定組分。